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聲明:上海賽抑生物科技有限公司為本公司(大連美侖生物)在上海地區(qū)的銷售分公司
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重組蛋白表達


哺乳動物細胞瞬時表達服務

服務介紹:
重組蛋白表達技術可用于多種下游應用,包括基因調控分析、蛋白結構及功能分析、蛋白質間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動物細胞等多種蛋白表達系統(tǒng)的蛋白定制服務。
我們擁有達到cGMP標準的百級潔凈細胞房,擁有豐富的CHO及HEK293細胞表達經(jīng)驗。
服務優(yōu)勢:

1、美侖生物的哺乳動物細胞蛋白表達技術團隊擁有豐富的CHO及HEK293細胞表達經(jīng)驗。

2、哺乳動物瞬時表達系統(tǒng)以HEK293細胞和CHO細胞為表達宿主。

3、高成功率:我們會分析您的蛋白/抗體基因序列,結合自主研發(fā)高表達載體,實驗成功率>95%。

4、我們專有的高密度(High Density, HD哺乳動物瞬時表達技術,以及優(yōu)化的表達方案和培養(yǎng)基,確保蛋白和抗體產(chǎn)量達到g級水平。

5、我公司哺乳動物表達系統(tǒng)可實現(xiàn)復雜糖基化修飾,蛋白活性更高。

6、可實現(xiàn)瞬時轉染表達,蛋白、抗體的快速小量制備。

7、具有完備的檢測平臺,如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質免疫印跡)等檢測平臺,可對蛋白的濃度、純度、活性等多項性能進行評估。

8、我們實行專人專項管理制度,即在整個項目期間,每個不同的實驗階段,都有相關人員與客戶進行對接,始終保持與客戶間的溝通,保證項目進展的透明化。

9、通過分步報價、按節(jié)點收費的方式,全面降低客戶的風險,極大程度上節(jié)約了客戶的成本。

10、具有一定的靈活性,我們可根據(jù)客戶的不同需求,提供不同的實驗方案,盡最大的努力滿足客戶的要求。

服務內容:

主要流程

時間

內容

交付內容

基因合成及密碼子優(yōu)化

1-2周

客戶提供目的蛋白的序列信息或質粒。


目標基因亞克隆到哺乳動物細胞表達載體

1-2周

1.克隆至表達載體
(可選擇的表達載體,pcDNA3.1等真核表達載體)
2.質粒測序
3.質粒制備

測序報告(若客戶要求)

小量轉染并通過Western Blot檢測表達

2-3周

1.瞬時轉染HEK293/CHO細胞
2.蛋白純化
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1. 0.1-0.5mg純化蛋白樣品
(如蛋白表達可行)
2. 質量檢驗報告 (CoA)

目標蛋白表達及純化

6-8周

目標蛋白的再加工及詳細檢測

篩選穩(wěn)定高效的細胞株

周期將延長



大量表達、純化及檢測(可選)

3-8周

100mg或更多蛋白
QC檢測

1.純化蛋白
2.質量檢驗報告 (CoA)

服務報價:15000元+(不含載體構建)


畢赤酵母(P.pastoris)表達服務


服務介紹:
重組蛋白表達技術可用于多種下游應用,包括基因調控分析、蛋白結構及功能分析、蛋白質間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動物細胞等多種蛋白表達系統(tǒng)的蛋白定制服務。
畢赤酵母蛋白表達服務,會從目的基因的特性,基因劑量,整合位點,以及宿主選擇,轉化子表型和培養(yǎng)條件等多方面入手,再通過文獻查閱,密碼子分析,蛋白表達系統(tǒng)條件優(yōu)化等途徑生產(chǎn)出高純度蛋白。
服務優(yōu)勢:

1、美侖生物具有豐富的酵母蛋白表達經(jīng)驗,已成功表達出多種重組蛋白。

2、我公司具有篩選酵母表達高拷貝菌株的服務,可以滿足客戶的多種特殊需求。

3、我公司利用酵母表達系統(tǒng)成功表達過具有二硫鍵蛋白及糖基化蛋白,使蛋白具有類似天然的結構和翻譯后修飾,保證了蛋白的活性。

4、酵母系統(tǒng)表達的過程中,對誘導時間及溫度的控制,對培養(yǎng)條件和菌株生長周期的把握直接影響到重組蛋白表達的成敗,美侖生物的技術人員對整合流程把握和控制,提高表達的成功率及表達水平。高生產(chǎn)率:分泌信號序列保證了重組蛋白的大分泌量。

5、我公司可提供兩種表達體系:可選擇組成性表達或者誘導表達兩種體系。

6、我公司具有多種菌株和載體可供選擇:我們提供包括X33, GS115等多種菌株和多種載體。

7、可進行大規(guī)模生產(chǎn),高達200L的生物反應器保證克級水平蛋白的生產(chǎn)。

8、我公司具有完備的檢測平臺,如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質免疫印跡)等檢測平臺,可對蛋白的濃度、純度、活性等多項性能進行評估。

9、我們實行專人專項管理制度,即在整個項目期間,每個不同的實驗階段,都有相關人員與客戶進行對接,始終保持與客戶間的溝通,保證項目進展的透明化。

10、通過分步報價、按節(jié)點收費的方式,全面降低客戶的風險,極大程度上節(jié)約了客戶的成本。

服務內容:

主要流程

內容

時間

交付內容

基因合成及密碼子優(yōu)化

客戶提供目的蛋白的序列信息或質粒。

1-2周


目標基因的亞克隆及
P.pastoris表達菌株電轉化

1.克隆至合適的表達載體
(可選擇的表達載體:pPICZα-A、pPIC9、pPIC9K、pPIC3.5K)
2.質粒測序
3.質粒制備

1-2周

測序報告(若客戶要求)

P.pastoris表達菌株篩選

酵母表達初篩

3-4周

1.1-3mg蛋白
2.表達評估報告

酵母表達菌株鑒定
(可選菌株:X33、GS115)

 

P.pastoris表達菌株表達優(yōu)化

酵母蛋白表達純化
(根據(jù)蛋白表達情況,選擇合適的純化方式)

3-4周

大量表達及純化(可選)

更多蛋白
QC檢測

3-8周

1.純化蛋白
2.質量檢驗報告 (CoA)

服務報價10000元+(不含載體構建)


桿狀病毒-昆蟲細胞蛋白表達服務

服務介紹:
重組蛋白表達技術可用于多種下游應用,包括基因調控分析、蛋白結構及功能分析、蛋白質間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動物細胞等多種蛋白表達系統(tǒng)的蛋白定制服務。
桿狀病毒表達系統(tǒng)(baculovirus expression vector system,BEVS)是當今基因工程四大表達系統(tǒng)之一。BEVS屬于真核表達系統(tǒng),通過BEVS得到的重組病毒易于篩選、具有翻譯后修飾功能、表達外源基因的效率較高。BEVS還可以同時表達多個外源基因,在分泌蛋白生物活性的同時增加產(chǎn)量。因此,BEVS在科研和工業(yè)生產(chǎn)中通常應用于大規(guī)模重組蛋白的制備。
服務優(yōu)勢:

1、高效性:我們的系統(tǒng)基于最新的技術,保證胞內或者分泌的重組蛋白的高水平表達。具有易于表達異源多聚體蛋白、安全性高等特點,重組表達的蛋白產(chǎn)品具有正確的翻譯后修飾和生物學活性,如二硫鍵的形成、磷酸化、糖基化等。

2、我公司昆蟲表達系統(tǒng)可表達分子量較大的外源性基因(最高可達200kD),適合大分子蛋白的表達;最高表達量可達昆蟲細胞蛋白總量的50%。

3、多種昆蟲動物細胞Sf9,Sf21及其它昆蟲細胞系可供選擇。

4、昆蟲表達系統(tǒng)比哺乳動物細胞表達系統(tǒng)操作簡單。

5、一站式解決方案,從基因合成到蛋白表達純化。

6、重組蛋白生物活性高,表達水平高,能同時表達多個基因。

7、可添加信號肽,促進蛋白更易純化。

8、相對哺乳動物細胞表達系統(tǒng)成本低。

9、具有完備的檢測平臺,如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質免疫印跡)等檢測平臺,可對蛋白的濃度、純度、活性等多項性能進行評估。

10、我們實行專人專項管理制度,即在整個項目期間,每個不同的實驗階段,都有相關人員與客戶進行對接,始終保持與客戶間的溝通,保證項目進展的透明化。

11、通過分步報價、按節(jié)點收費的方式,全面降低客戶的風險,極大程度上節(jié)約了客戶的成本。

12、具有一定的靈活性,我們可根據(jù)客戶的不同需求,提供不同的實驗方案,盡最大的努力滿足客戶的要求。

服務內容:

主要流程

時間

內容

交付內容

基因合成及密碼子優(yōu)化

1-2周

客戶提供目的蛋白的序列信息或質粒。


目標基因亞克隆到pFastBac供體質粒

1-2周

1.克隆至表達載體
2.質粒測序
3.質粒制備

測序報告(若客戶要求)

制備重組桿狀病毒Bacmid DNA

2-3周

1.病毒包裝
2.病毒擴增


目的蛋白的表達純化

2-4周

1.病毒侵染細胞
2.小量表達、純化及條件優(yōu)化
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1. 0.1-0.5mg純化蛋白樣品
(如蛋白表達可行)
2. 質量檢驗報告 (CoA)

大量表達、純化及檢測
(可選)

3-8周

100mg或更多蛋白
QC檢測

1.純化蛋白
2.質量檢驗報告 (CoA)

服務報價:20000元+(不含載體構建)

大腸桿菌(E.coli)表達系統(tǒng)服務

服務介紹:
重組蛋白表達技術可用于多種下游應用,包括基因調控分析、蛋白結構及功能分析、蛋白質間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動物細胞等多種蛋白表達系統(tǒng)的蛋白定制服務。
原核表達系統(tǒng)是通過原核生物來獲得外源蛋白的體系。原核表達是目前常用的重組蛋白表達方式之一,操作相對簡便,要求較低。相對哺乳動物表達系統(tǒng)更加經(jīng)濟節(jié)約。
服務優(yōu)勢:

1、美侖生物擁有豐富的大腸桿菌可溶性蛋白表達、純化及蛋白變復性經(jīng)驗。

2、我公司擁有多種E. coli細胞株和表達載體,滿足特定蛋白質胞內表達及周質空間分泌表達需求。也可利用SUMO、GST、Trx及NusA等促融標簽解決蛋白自身疏水性造成不可溶表達問題。提供從密碼子優(yōu)化到重組蛋白表達、純化的一站式服務以及標簽去除、內毒素去除等附加服務,以滿足不同的定制需求。

3、針對于有些外源基因在大腸桿菌中重組表達會形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白質的包涵體的情況,我們會進行表達系統(tǒng)優(yōu)化,盡量降低形成包涵體的幾率。

4、我們會通過評估確定復性條件,進行溫和的包涵體變復性。

5、我們提供的復性蛋白純度在95%以上。對于客戶要求切除標簽的情況,我們可以做到切標簽不留殘基。

6、我們具有特色的低溫誘導表達體系,提高了蛋白可溶表達幾率,增加了表達成功和蛋白產(chǎn)物的活性概率??蔀榭蛻籼峁﹥?yōu)質的原核蛋白表達服務。

7、可進行大規(guī)模生產(chǎn)。

8、具有完備的檢測平臺,如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質免疫印跡)等檢測平臺,可對蛋白的濃度、純度、活性等多項性能進行評估。

9、我們實行專人專項管理制度,即在整個項目期間,每個不同的實驗階段,都有相關人員與客戶進行對接,始終保持與客戶間的溝通,保證項目進展的透明化。

10、通過分步報價、按節(jié)點收費的方式,全面降低客戶的風險,極大程度上節(jié)約了客戶的成本。

服務內容:

主要流程

時間

內容

交付內容

基因合成及密碼子優(yōu)化

1-2周

客戶提供目的蛋白的序列信息或質粒。


載體構建

1-2周

1.克隆至合適的表達載體(可選擇的表達載體以pET和pGEX系列為主)
2.質粒測序
3.質粒制備

測序報告(若客戶要求)

表達鑒定及可溶性分析

1-2周

1.10mL培養(yǎng)
2.3個表達條件嘗試
3.表達菌株的選擇
4.蛋白表達評估 (SDS-PAGE)

表達評估報告

放大表達和1-2步純化

1-2周

1.蛋白純化 (可溶表達)
2.蛋白變性復性純化 (包涵體)
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1.0.5-1mg純化蛋白樣品
(如蛋白表達可行)
2.質量檢驗報告 (CoA)

大量表達及純化(可選)

2-8周

1.100mg或更多蛋白
2.QC檢測

1.純化蛋白
2.質量檢驗報告 (CoA)

附加項訂購信息

時間

內容

交付內容

蛋白去內毒素

1-2周

去除蛋白內毒素

質量檢測報告(CoA)

服務報價:8000元+(不含載體構建)